细胞体冷冻保存，单纯来讲，就是把细胞“冰封”起来，等须要的时候再取出来用。听上去是否是有点像科幻片子里的冷冻人？事实上它位于医药学和科研领域使用颇为普遍，比如保存免疫细胞、肿瘤细胞个体等等。下面我们就来聊聊其所在用途和详细操作过程。

一、细胞冻存有什么用？

1. 保存珍贵细胞体资源

有些细胞体特别贵重，比方免疫细胞个体，它们可能在将来用于疾病治疗要么科研试验。要是不做冻存，这一些细胞体在体外培育一段时间后就会老化甚至死亡。

2. 避免反复培养挥霍时间

实践室里时常需打算使用同一批细胞体做实践，如若每次都要从头培育，既费时又费力。冷冻保存好随后，需要用的时候直接冻结就能了，免去很多时间和资本。

3. 防止污染和变异

细胞在长远培育期间可能会被细菌、病毒弄脏，或者产生基因变异。尽早冻存原始状态的细胞，可以保证试验数据的正确性和一概性。

4. 运用于疾病治疗

比方骨髓移植、免疫治疗、癌症治疗等，都须要提早保存患者的细胞体，等须要的时候再回输到身体内。这会候冷冻保存的细胞个体就能派上大用场了。

5. 科研研究的基础

许许多多医学研究都依赖于细胞实验，比如新药开辟、基因编纂等。细胞个体冷冻保存技术确保了研究过程当中细胞个体的一概性和稳定性。

二、细胞冻存的过程是怎样的？

整个过程可以分红几个方法，每一步都很重要，不可大意。

1. 细胞准备

在冷冻保存此前，首先要保障细胞状态优秀。就像我们外出旅行前要吃饱睡好同样，细胞个体也要在较好状况下才能冷冻保存。一般会选在细胞个体成长旺盛、没有污染的时候进行操作。

- 细胞数目要合适，不能过少同样不能太多。

- 培养液要换新的，坚持养分充分。

- 保证没有细菌、霉菌等弄脏。

2. 细胞收集

这一步主要是把细胞个体从培育皿或培养瓶里收集起来。

- 用胰酶等消化液把贴壁的细胞体从容器上“剥”下来。

- 用离心机器把细胞集结到一个小管里，去掉多余的培育液。

- 重悬细胞体，使之平衡地疏散在冷冻保存液中。

3. 加入冻存液

冷冻保存液是特定用来保养细胞在高温下不被冻坏的液体。里面通常包含：

DMSO（二甲基亚砜）：能防止冰晶形成，养护细胞膜。

胎牛血清：提供营养，加强细胞的抗冻本事。

基础培育基：维系细胞体的基本存留环境。

注意：DMSO有一定的毒性，于是在使用前要现配现用，而且操作时要戴手套、口罩，做好防备。

4. 分装冻存

将细胞悬液分装到冻存管里，每支冻存管大约装1毫升左右。然后盖紧盖子，做好标识表记标帜，比如细胞称号、日期、操作人等。

5. 控制降温速度

这便是全部过程最关键的一步。如果退热太快，细胞内会形成冰晶，破坏细胞体结构；如果太慢，细胞可能会脱水死亡。

普通的作法是：

- 把冻存管放进一个特定用的冷冻保存盒里，里面装有异丙醇，可以把握降温速度。

- 把冻存盒放进-80℃冰箱，放一到两天。

- 其后再转移到液氮罐子里面长远保存。

若无冷冻保存盒，同样可以用厚毛巾把冻存管包起来，再装入里面-80摄氏度冰箱，虽然成果可能差点，但同样能应急使用。

6. 长期保存

最终，细胞会被转至液态氮罐中保存。液氮的温度可以达到-196℃，在这个气候温度下，细胞的确停下了所有代谢活动，可以保存几年以致几十年。

7. 解冻使用

当需要使用冷冻保存的细胞时，要快捷冻结，避免冰晶重新构成。

- 从液氮从里面取出冷冻保存管，迅速放入37摄氏度水沐浴中悄悄摇摇。

- 等细胞个体十足融化后，插手培养液冲淡冻存液。

- 离心去除DMSO，再重新悬停细胞体，接种到新的培育瓶中继续培育。

三、注意事项

安全第一：操作DMSO时要戴手套和口罩，预防触碰皮肤和吸进。

标识表记标帜清楚：冷冻保存管上要写清晰细胞体种类、日期、编号，预防混淆。

防止重复冷冻融化：细胞个体一旦冻结，就切勿再放归去，否则会影响存活率。

定期检查：液态氮罐要准时添补液态氮，预防气温升高数值造成细胞个体死亡。

纪录详细：囊括操作人、细胞个体情况、冷冻保存液配方等，方便后续搜寻。

概括，细胞体冷冻保存尽管看起来只是“把细胞体冻起来”，但其实每一步都讲究细微之处。它不仅保护了贵重的细胞资本，也为科研和医药学提供了极大的便捷。掌握了无误的冻存方法，就能让细胞个体在“甜睡”多年后依然保持活力，随时为实验或治疗“睡醒”。

要是你是刚触碰细胞体培育的新手，建议多求教富有经验的长辈，要么参考实验室的标准操作步骤，确保每一步都做成位。终究，细胞是很娇贵的“小生命”，我们要用心对于它们。

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